花生四烯酸(AA)酶联免疫吸附测定试剂盒

产品介绍:

检测原理 试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 (ELISA) 。往预先包被植物果糖花生四烯酸(AA)酶联免疫吸附测定试剂盒抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗...


  • 物品单位:
  • 品牌: 科翰盛
  • 产地: 上海
  • 型号: 48T 96T
  • 货号: KHSJ17841

产品详细说明

产地 上海
保存条件 2-8℃冷藏
品牌 科翰盛
货号 KHSJ17841
检测方法 酶联免疫
保质期 6
规格 48T 96T
适应物种 多物种
数量 666
用途范围 科研实验
样本 血清,血浆,尿液,组织等
应用 科研

检测原

盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验 (ELISA) 。往 包被植物果糖花生四烯酸(AA)酶联免疫吸附测定试剂盒 抗体的包被微孔中,依 次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并洗涤 用底物TMB显色,TMB在化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的 作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的花生四烯酸(AA)酶联免疫吸附测定试剂盒 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光  (OD ) ,计算样品活性

品收集、处理及保存方法

1.  样本不能含叠氮钠 (NaN3) ,因为叠氮钠 (NaN3) 是辣根 化物酶 (HRP) 的剂

2.  标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。

3.  植物萃取液或其它相关样本:请1000 x g离心20分钟,取上清 可检测。

4.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存

 

 

 

-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解

自备物品

1. 酶标仪 (450nm)

2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3. 37℃恒温箱

作注意事项

1.  试剂盒保存在 2-8℃ ,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的 缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解 后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封 (低温干燥) 保 

3.  浓度 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明 书操作时样本已经稀释 5 倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。


 


 

 

 

试剂盒组成

 

96 孔配

48 孔配置

微孔酶标板

12 孔×8

12 孔×4

准品

0.3mL*6 管

0.3mL*6 管

样本稀释液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物 A

6mL

3mL

B

6mL

3mL

止液

6mL

3mL

封板膜

2 

2 张

说明书

1 

1 

封袋

1 

1 

注:标准品 (S0-S5) 浓度依次为:0,20,40,80,160,320 U/mL

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按 1:20 稀释,即 1 份的20×洗涤 缓冲液加 19 份的蒸馏水。

洗板方法

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置 1min 后甩尽 孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板 5 次

2.  自动洗板机:每孔注入洗液 350 μL,浸泡 1min,洗板 5 次。

1.  从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自 袋密封放回4℃。

2.  设标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50 μ L

3.  样本孔先加待测样本 10 μL,再加样本稀释液 40 μL;空白孔不 加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根化物酶  (HRP) 标记的检测抗体 100 μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅 或恒温箱温育 60min

5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 1min,甩去 洗涤液,吸水纸上干,如此重复洗板 5 次 (也可用洗板机洗板) 。

6.  每孔加入底物 A、B 各 50 μL,37℃避光孵育 15min。

7.  每孔加入终止液 50 μL15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。

果判断

绘制准曲线:在 Excel 工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应 OD 作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样 浓度值。


责声明

1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或实验,否则所 生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者 担。

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

试剂盒性能

1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于

0.9900。

2.  灵敏度:检测浓度小于 0.1 U/mL

3.  特:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。

5.  贮藏:2-8℃ ,避光防潮保存。